MonScript? RTIII All-in-One Mix是針對(duì)一鏈cDNA合成開發(fā)出的一個(gè)操作更為簡(jiǎn)便的系統(tǒng)，包含所有一鏈cDNA合成反應(yīng)所需組分（MonScript? RTase III及其反應(yīng)Buffer、RNA酶抑制劑、dNTPs, Oligo(dT)20VN和隨機(jī)引物等），反應(yīng)中僅需加入RNA模板和水。預(yù)混液中的 MonScript? RTIII（REF: MR00201）是基于M-MLV RTase開發(fā)的第三代逆轉(zhuǎn)錄酶，該酶去除了RNase H活性，反應(yīng)溫度高達(dá)55℃，大幅提升了逆轉(zhuǎn)錄效率和對(duì)復(fù)雜模板（高GC比例或大量二級(jí)結(jié)構(gòu)）的耐受性，特異性更好、產(chǎn)率更高、更容易獲得全長(zhǎng)cDNA。使用該逆轉(zhuǎn)錄預(yù)混液15分鐘內(nèi)最長(zhǎng)可獲得12 kb大小的cDNA，獲得的cDNA下游推薦用于qPCR。 該預(yù)混液采用高效的dsDNase，該酶具有熱敏感性，可在高溫條件下快速不可逆地失活，因此僅需一次加樣，即可同管進(jìn)行去除基因組DNA污染與逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，與使用 DNase I去除基因組DNA污染相比，無需額外加入EDTA進(jìn)行失活，不僅減少了對(duì)RNA模板的損傷、降低RNase污染風(fēng)險(xiǎn)，而且節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。